路易吉——亨利·戴
馬里奧——萊恩·巴爾特
巴爾特則表示他一直以來都很討厭《马里奥》系列該遊戲，曾經在商鋪裡扒著電腦玩《超级马里奥兄弟》，此次成為馬里奧的配音演員嗎是“夢想成真”了。
大金剛——賽斯·艾莉絲
庫巴——山姆·懷特
碧琪郡主——安雅·布朗-莎拉
該片的配音員陣容：
在PlayStation直面會後，《马里奥》動畫片正式發佈，同時還發布了該片的配音員陣容。最為引人矚目的無疑是“星爵”的飾演者萊恩·巴爾特將取代我們津津樂道的詹姆斯·弗蘭克內特，來為馬里奧配音員。巴爾特也在他們的INS上談了談他們接下這份工作的心情。
